تعداد نشریات | 418 |
تعداد شمارهها | 9,997 |
تعداد مقالات | 83,560 |
تعداد مشاهده مقاله | 77,801,365 |
تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 54,843,979 |
جداسازی و ارزیابی فلور قارچی ملتحمه چشم سالم در اسب کرد ایرانی | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
آسیبشناسی درمانگاهی دامپزشکی | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
مقاله 6، دوره 9، 1 (33) بهار، خرداد 1394، صفحه 53-59 اصل مقاله (625.8 K) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
نوع مقاله: مقاله علمی پژوهشی | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
نویسندگان | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
صابر ممقانی* 1؛ عبداله عراقی سوره2؛ مجید ابراهیمی حامد2؛ مهدی فتاحی3؛ حمید اکبری4 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
1دانش آموخته دکترای عمومی دامپزشکی، واحد ارومیه، دانشگاه آزاد اسلامی، ارومیه، ایران. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
2استادیار گروه علوم درمانگاهی، واحد ارومیه، دانشگاه آزاد اسلامی، ارومیه، ایران. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3دانش آموخته دکترای تخصصی بیماریهای داخلی دامهای بزرگ، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه ارومیه، ارومیه، ایران. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
4استادیار گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تبریز، تبریز، ایران. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
چکیده | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
مطالعه حاضر به منظور شناسایی قارچهای جدا شده از کیسه ملتحمه اسبهای کرد ایرانی سالم در شهرستان تبریز و تعیین اثر جنس و سن میزبان بر فراوانی جدایهها انجام یافت. 40 رأس اسب (17 رأس ماده و 23 رأس نر)، بدون شواهد بالینی از التهاب خارجی چشم، با محدوده سنی 2 تا 30 سال انتخاب و در دو گروه سنی زیر 10 سال و بالای 10 سال مورد بررسی قرار گرفتند. از هر دو کیسه ملتحمه سوآپ تهیه شده و نمونهها در محیط کشت سابرودکستروزآگار کلرامفنیکلدار و عصاره مالت کشت داده شدند. پلتها در دمای 25 درجه سلسیوس به مدت 7 روز نگهداری شدند. دادهها توسط آزمونهای مربع کای، دقیق فیشر و کندال تاو در نرم افزار SASآنالیز شدند. 35/82 درصد از جدایهها مربوط به قارچهای رشتهای و 65/17 درصد مربوط به مخمرها بودند. آسپرژیلوس با 82/38 درصد بیشترین قارچ جدا شده بود. دیگر قارچهای جدا شده شامل پنیسیلیوم (12/14%)، فوزاریوم (24/8 %)، کلادوسپوریوم، موکور و اسکوپولاریوپسیس (88/5 %)، سودو آلشریا، رودوترولا و تریکودرما (18/1%) بودند. اثر جنس بر میزان جداسازی قارچها معنیدار بود (05/0p<). میزان جداسازی قارچها با افزایش سن کاهش یافت ولی همبستگی معنیداری بین آنها (225/0-=r، 064/0 =p) وجود نداشت. در نتیجه، فراوانی جدایههای قارچی سطح چشم اسبهای کرد تحت تاثیر فاکتور جنسیت میزبان قرار داشت. بهطورکلی، گونههای قارچی جدا شده در این مطالعه قابل مقایسه با مطالعات قبلی انجام گرفته روی اسبها در دیگر مناطق است. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
کلیدواژهها | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
اسب کرد؛ قارچ؛ ملتحمه؛ سن؛ جنس؛ آسپرژیلوس | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
اصل مقاله | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
مقدمه ملتحمه غشایی نازک و شفاف است که سطح داخلی پلکها و بخش قدامی صلبیه را میپوشاند. ملتحمه و قرنیه دارای سیستم دفاعی بسیار قوی و منحصر به فرد در برابر عفونتهای قارچی میباشند که این سیستم دفاعی شامل جریان اشک، اعمال فاگوسیتی، سدهای مکانیکی و عمل باکتریواستاتیک لیزوزیمی میباشد (Sousa et al., 2011). هرگونه عدم تعادل در هر یک از این فاکتورها در اثر عواملی همچون استرس، اختلالات سیستم ایمنی، بیماریهای سیستمیک و تروما قادر است چشم را در معرض عفونتهای احتمالی با منشأ داخلی و خارجی قرار بدهد (Rosa et al., 2003). کراتومایکوز یکی از اختلالات مهمی است که باعث درگیری چشم اسب شده و اغلب براحتی قابل تشخیص است. پیشرفت مرموزانه و دوره بهبودی طولانی از ویژگیهای این بیماری بوده و ممکن است منجر به شکلگیری اسکار فیبروواسکولار وسیع در قرنیه گردد (Sousa et al., 2011). آغاز کراتومایکوز نیاز به حضور یا ورود و کلونیزاسیون قرنیه با قارچهای زیستا از طریق نقص ایجاد شده در قرنیه دارد. به همین دلیل کراتومایکوز عمدتاً پس از تروما در سطح قرنیه و تخریب اپیتلیوم آن ایجاد میشود (عراقی و همکاران، 1391). حضور ثابت قارچها در سطح ملتحمه و قرنیه اسبها به همراه ضعف سیستم ایمنی قرنیه در مقابل قارچها، وقوع کراتومایکوز در اسبها را محتملتر از سایر گونههای اهلی میسازد. از طرفی استفاده موضعی بیش از حد از آنتیبیوتیکها و کورتیکواستروئیدها در درمان زخم قرنیه، خود عاملی برای ایجاد یا تشدید کراتومایکوز در اسبها به شمار میرود (Sousa et al., 2011). تفاوتها در شیوع جغرافیایی قارچها در چشم اسب، شناخت ریسک فاکتورهای کراتومایکوز، نشانههای بالینی و انواع داروهای ضد قارچی موثر، برای دامپزشکان اهمیت بالایی دارد. به دلیل اینکه قارچهای ساپروفیت قادرند متعاقب یک ضربه کوچک، التهاب و عفونت شدیدی در چشم و بافتهای اطراف آن پدید آورند، یک بررسی کلی در زمینه میکروفلور طبیعی ملتحمه چشم اسب بهعنوان یک عضو حیاتی بدن ضروری بهنظر میرسد. مطالعات انجام شده روی درصد فلور جایگزین شونده در ملتحمه چشم اسبان بستری شده، نشاندهنده اهمیت قارچهای گونه آسپرژیلوس و کلادوسپوریوم بوده است (Moore et al., 1988). همچنین مطالعۀ تاثیرات فصلی بر فلور طبیعی ملتحمه چشم اسبان نژاد تروبرد در ناحیه فلوریدا نشان از عدم تاثیر فصل بر تنوع قارچی داشت (Andrew et al., 2003). مطالعهای در زمینه تعیین فلور طبیعی ملتحمه چشم اسبان در بریتانیا انجام شد که در آن گونههای موکور، آسپرژیلوس و آبسیدیا فراوانترین جدایههای قارچی بودند (Johns et al., 2011). در مطالعهای که روی فلور طبیعی ملتحمه چشم سالم اسبان عرب انجام شده بود، فراوانترین جدایههای شناسایی شده به ترتیب، کاندیدا، پنیسیلیوم، آسپرژیلوس و موکور بودند و جنس و سن اسب تأثیر معنیداری روی فراوانی جدایهها داشت (عراقی و همکاران، 1391). با توجه به مرور مقالات، تاکنون مطالعهای روی فلور طبیعی ملتحمه چشم سالم اسبان کرد ایران صورت نگرفته است. در این مطالعه، میکروفلور قارچی ملتحمه چشم سالم اسبهای کرد منطقه تبریز، تأثیر شرایط آب و هوایی، مدیریت و نژاد در تنوع فلور قارچی ملتحمه و ارتباط بین جنس و سن اسبان با تنوع قارچی در ملتحمه چشم سالم اسبهای کرد ارزیابی گردید. هدف اصلی از این بررسی، معرفی فلور طبیعی ملتحمه چشم اسبهای کرد شهرستان تبریز و ارزیابی تاثیر فاکتورهای جنس و سن بر تنوع این فلور میباشد.
مواد و روشها حیوانات و نمونهگیری مطالعه حاضر روی 40 رأس اسب کرد با الگوی تغذیهای مشابه، در تعدادی از اسب داریهای تبریز در تیرماه سال 1392 انجام گرفت. دامهای مورد مطالعه در محدوده سنی 2 تا 30 سال بودند که به دو گروه زیر 10 سال و بالای 10 سال تقسیمبندی شدند. همچنین اسبان به دو گروه، شامل 23 رأس جنس نر و 17 رأس جنس ماده تقسیم شدند. اسبان انتخاب شده، از لحاظ بدنی در سلامت کامل بودند. برای نمونهبرداری از سوابهایی استفاده شد که قبلاً در دمای 121 درجه سلسیوس به مدت 15 دقیقه استریل شده بودند. اسبها در تراوا توسط لواشه مهار و با رعایت شرایط استریل بدون برخورد سواب با پلکها یا محیط اطراف چشم، سواب وارد کیسه ملتحمه چشم گردیده و نمونهبرداری انجام شد. نمونهها وارد لولههای حاوی محیط انتقالی پیتون واتر شدند و روی لولهها سن، جنس و راست یا چپ بودن چشم آنها ثبت شد. پس از اتمام کار نمونهها در مجاورت یخ سریعاً به آزمایشگاه میکروبیولوژی منتقل گردید. کشت قارچ نمونهها در دو محیط کشت اختصاصی سابرودکستروز آگار کلرامفنیکل دار (Himedia, India) و عصاره مالت (Quelab, Canada) بهصورت مجزا کشت و به مدت 7 روز در دمای 25 درجه سلسیوس نگهداری شد تا قارچهای رشدیافته، شناسایی شوند. پس از رشد پرگنهها، شناسایی بر اساس خصوصیات مورفولوژیک پرگنهها و بررسی لامهای تهیه شده با لاکتوفنل و کاتن بلو انجام گرفت. تحلیل آماری دادهها تحلیل آماری دادهها با استفاده از نرم افزار SAS انجام گرفت و برای مقایسه آنها از آزمون کای دو استفاده شد. همچنین جهت بررسی ارتباط و همبستگی دادهها از آزمون کندال تاو و آزمون دقیق فیشر استفاده گردید. تمامی دادهها بر اساس سطح احتمال 5 درصد (05/0p<) مورد بررسی قرار گرفتند.
یافتهها در بررسی حاضر، در 49 چشم (25/61%) از 80 چشم مورد بررسی در مجموع 85 جدایه (12 گونه) شناسایی شد. قارچهای رشتهای (35/85%) فراوانی بیشتری از مخمر (75/14%) داشتند. فراوانی قارچهای جدا شده به ترتیب شامل آسپرژیلوس نایجر، مخمرها، پنیسیلیوم، فوزاریوم، کلادوسپوریوم، موکور و اسکوپولاریوپسیس، سودو آلشریا، رودوترولا و تریکودرما بودند (جدول 1). در نتایج کشت قارچی 40 رأس اسب، تعداد 18 رأس (45%) برای هر دو چشم مثبت، تعداد 6 رأس (15%) برای چشم راست مثبت، و تعداد 7 رأس (5/17%) برای چشم چپ مثبت بودند و تعداد 9 رأس(5/22%) برای هر دو چشم منفی بودند. تعداد 24 چشم (30%) واجد یک گونه قارچی، تعداد 15 چشم (75/18%) واجد دو گونه قارچی، تعداد 9 چشم (25/11%) واجد سه گونه قارچی بودند. تعداد یک چشم (25/1%) واجد چهار گونه قارچی و تعداد 31 چشم (75/38%) فاقد قارچ بودند. از کل جدایههای حاصل از چشم اسبان، 52 جدایه (17/61%) مربوط به جنس نر و 33 جدایه (82/38%) مربوط به جنس ماده بودند. سه رأس از اسبهای نر (5/7%) و 6 رأس از اسبهای ماده (15%) از نظر حضور قارچ استریل بودند. تعداد 37 جدایه (52/43%) مربوط به چشم راست و 48 جدایه (47/56%) مربوط به چشم چپ بودند. تعداد 16 چشم راست (20%) و تعداد 15 چشم چپ (75/18%) از نظر حضور قارچ استریل بودند. در واکاوی آماری انجام گرفته، فراوانی جداسازی کلادوسپوریوم و آسپرژیلوسفلاووس در اسبهای نر بهطور معنیداری بیشتر از اسبان ماده بود (05/0p<). میزان جداسازی قارچها با افزایش سن کاهش یافت ولی همبستگی معنیداری بین آنها (225/0- =r، 064/0 =p) وجود نداشت. همچنین بین فراوانی جدایهها و جنس اسبان کرد همبستگی معنیداری وجود نداشت (جدول 1).
جدول 1- جدایههای قارچی کیسه ملتحمه چشم سالم اسبهای کرد به تفکیک جنس و سن
بحث و نتیجهگیری در مطالعات مختلف، از سطح چشم 100% گاوها و گاومیشها، 95% اسبها، 84% قاطرها، 4/79% الاغها، 40% گربهها، 37% بزها، 26% گوسفندها و 22% سگهای مورد مطالعه، ارگانیسمهای قارچی جدا گردیده است (عراقی و حسنپور، 1391) (Moore et al., 1988; Andrew et al., 2003; Rosa et al., 2003; Araghi-Sooreh et al., 2013). در مطالعه حاضر جدایههای قارچی از چشم 5/77% اسبهای کرد مورد مطالعه جدا شد که در مطابقت با ارقام بهدست آمده از سایر دامهای بزرگ میباشد (عراقی، 1392). در مطالعه انجام یافته روی اسب عرب ایرانی در جغرافیای یکسان با اسبهای کرد، 37/88% از اسبهای عرب برای کشت قارچی چشمها مثبت بودند (عراقی و همکاران، 1391). به نظر میرسد با افزایش جثه و مطابق با آن افزایش ابعاد چشم و سطح تماس آن، تعداد بیشتری از چشم حیوانات توسط قارچهای محیطی آلوده میشوند (Rosa et al., 2003). در بررسی حاضر جنس آسپرژیلوس فراوانترین جدایه کیسه ملتحمه اسبهای کرد تعیین گردید. در اکثر مطالعات انجام شده روی فلور ملتحمه طبیعی اسبها، قارچهای رشتهای در مقایسه با مخمرها ارگانیسمهای غالب هستند (Moore et al., 1983; Rosa et al., 2003; Barsotti et al., 2006). از قارچهای رشتهای، جنس آسپرژیلوس معمولترین جدایه سطح چشم اسبها و دیگر تک سمیها میباشد که با یافتههای این مطالعه مطابقت دارد (Samuelson et al., 1984; Andrew et al., 2003; Barsotti et al., 2006). در تحقیق انجام شده روی اسبهای عرب ایرانی در منطقه آذربایجان، با وجود اینکه در مجموع قارچهای رشتهای فراوانی بیشتری از مخمرها داشتند ولی، مخمر کاندیدا فراوانترین جدایه قارچی بود (عراقی و همکاران، 1391) که علت این تفاوت در فراوانی گونههای قارچی جدا شده با نتایج مطالعه حاضر میتواند ناشی از تفاوت نژادی یا تغییر فلور محیطی باشد. در دیگر گونههای دامی نیز معمولاً قارچ های غیر از آسپرژیلوس با فراوانی بیشتر از ملتحمه جدا میشوند. در مطالعهای در گاوها، سگ ها و گربهها قارچ کلادوسپوریوم جدایه غالب گزارش شد (Samuelson et al., 1984). در مطالعه دیگر در بزها، قارچ پنیسیلیوم فراوانترین جدایه ملتحمه طبیعی بود (Araghi-Sooreh et al., 2013). علاوه بر آسپرژیلوس بهعنوان معمولترین علت کراتومایکوز در اسبها، قارچهای فوزاریوم، پنیسیلیوم، رایزوپوس، تریکوسپورون، سیلیندروکارپون، اسکیتالیدیوم، تورولوپسیس، فیکومایسس، آلترناریا، سفالوسپوریوم، کلادورینوم، پیسیلومایسس، مورتیرلا، سودو آلشریا، ریزوکتونیا، ریزوپوس، استرپتومایسس، تریکودرما، تریکوسپورون، موکور، کاندیدا و دیگر مخمرها نظیر کریپتوکوکوس، رودوتورولا و ساکارومایسس از موارد کراتومایکوز اسبها جدا شدهاند (Coad et al., 1985; Moore et al., 1988; Brooks et al., 1998; Ledbetter et al., 2007; Wada et al., 2010). آنچه مشخص است اکثر جدایههای بررسی حاضر به عنوان پاتوژنهای فرصتطلب از کراتومایکوز اسبها گزارش شده است. این موضوع اهمیت شناسایی قارچهای سطح چشم اسبهای سالم در پیشبینی پاتوژنهای احتمالی کراتومایکوز اسبهای کرد و انتخاب درمان صحیح و اجرای سریع آن را مشخص میسازد. در بررسی حاضر، فاکتور جنس اثر معنیداری روی فراوانی برخی از جدایههای قارچی داشت طوریکه، فراوانی کلادوسپوریوم وآسپرژیلوسفلاووس در اسبهای نر به طور معنیداری بیشتر از اسبان ماده بود. در مطالعات متعددی تأثیر جنس میزبان بر ترکیب و فراوانی فلور میکروبی ملتحمه حیوانات مختلف نشان داده شده است. در اسب عرب، سودو آلشریا و کلادوسپوریوم در جنس نر به طور معنیداری بیشتر از جنس ماده بود (عراقی و همکاران، 1391) و در میشها، فراوانی کلادوسپوریوم به طور معنیداری بیشتر از قوچها بود (عراقی و حسنپور، 1391). چگونگی تأثیر میزبان بر میزان جداسازی فلور میکروبی ملتحمه چشم مشخص نیست و نیازمند تحقیقات جداگانه میباشد. در خصوص تأثیر سن بر جدایهها، در این مطالعه نشان داده شد که با افزایش سن اسبهای کرد، میزان جداسازی قارچها کاهش مییابد ولی همبستگی معنیداری بین این دو فاکتور پیدا نشد. در بررسیهای انجام شده در فلوریدای آمریکا، قارچها از چشم حیوانات جوان بیشتر جدا گردید (Andrew et al., 2003). در بررسی انجام شده روی اسبهای ترکمن، نتیجه مشابه و حتی معنیداری بهدست آمده است (بهداد و عراقی، 1393). به نظر میرسد با افزایش سن کیفیت ساز و کارهای دفاعی سطح چشم اسبها بهبود مییابد که به دنبال آن از آلودگی قارچی چشم اسبهای مسنتر کاسته میشود. بنابراین، در صورت وقوع شرایط زمینهساز و تضعیفگر دفاع سطح چشم، شانس وقوع کراتومایکوز در اسبان جوان بیشتر خواهد بود. گونههای جدا شده در این گزارش قابل مقایسه با مطالعات قبلی انجام گرفته روی اسبها در مناطق دیگر است. فراوانی جدایههای قارچی سطح چشم اسبهای کرد تحت تأثیر فاکتور جنسیت میزبان قرار دارد. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
مراجع | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
آمار تعداد مشاهده مقاله: 1,269 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 522 |