پیوندهای مفید
اخبار و اعلانات
آمار
| تعداد نشریات | 418 |
| تعداد شماره‌ها | 9,997 |
| تعداد مقالات | 83,560 |
| تعداد مشاهده مقاله | 77,801,172 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 54,843,831 |
بررسی ترمیم نقص استخوان بااستفاده ازغشاءژلاتین-کیتوسان وسلول‌های بنیادی مشتق ازچربی درموش صحرایی(ارزیابی هیستومورفومتری وایمونوهیستولوژیک) | ||
| زیست شناسی تکوینی | ||
| مقاله 4، دوره 7، شماره 4 - شماره پیاپی 28، آذر 1394، صفحه 31-44 اصل مقاله (3.55 M) | ||
| نوع مقاله: مقاله پژوهشی | ||
| چکیده | ||
| (ADSCs)سلولهایچنداستعدادیهستندکهقابلیتتمایزبهسلولهایاستئوژنیکرادارند.ازداربستهایکیتوسانوژلاتینکهساختاریزیستتخریبپذیروزیستسازگاردارندجهتترمیمبافتهااستفادهمیشوند.دراینبررسی60سرموشصحرائیبهطورتصادفیدرپنجگروهقرارگرفتند.1-شاهد:هیچگونهدرمانیدریافتنکردند2-شم:محیطکشتدرمحلنقصتزریقشد3-غشاء:ازژلاتین-کیتوساندرمحلنقصاستخوانیاستفادهشد.4-سلول:پیوندسلولهایADSCدرمحلنقصانجامشد.5-سلول–غشاء:سلولبههمراهغشاءژلاتین-کیتوساندرمحلنقصپیوندگردید.ارزیابیهایایمونوهیسیتوشیمیوهیستومورفومتریدرگروههایمختلفموردبررسیقرارگرفت.میانگینمساحتترابکولایاستخوانیدرگروههایغشاء،سلولوسلول-غشاءنسبتبهگروهشاهدافزایشمعنیداریرانشانداد.همچنینمیانگینتعداداستئوسیتهادرناحیهنقصاستخوانیدرگروههایسلولوسلول-غشاءنسبتبهگروهشاهدکاهشمعنیداریداشتندگرچهدرگروهغشاءکاهشبصورتغیرمعنیدارمشاهدهگردید.بهنظرمیرسدکهاستفادهازداربستغشاءژلاتین-کیتوسانهمراهباپیوندسلولهایADSCجهتترمیمنقصاستخوانیموثرباشد. | ||
| کلیدواژه‌ها | ||
| سلولهایADSC؛ غشاءژلاتین-کیتوسان؛ پیوندسلول؛ ترمیم استخوان؛ موش صحرایی | ||
| اصل مقاله | ||
|
یکیازعوارضشکستگیاستخوانهاتاخیرویاعدمجوشخوردنکاملآنمیباشد.پوکیاستخوانبهدنبالافزایشسنوعدمجوشخوردنآنپسازشکستگیمیتواندسببزمینگیرشدنبیماروتحمیلهزینههایسنگینبرایفردوجامعهشود[5].محققینهموارهدرصددندتاروشدرمانیمناسبیبرایتسریعجوشخوردناستخوانپیداکنند.پیوندسلولهایبنیادیتمایزیافتهبهسلولهایاستخوانسازامیدهایزیادیرابرایبازسازیضایعاتمذکوربوجودآوردهاست[6-18].درمواردپبوندبافتاستخوانیجهتترمیمضایعاتاستخوانی،تعداداندکسلولهایاستخوانسازازمحدودیتهایسرعتجوشخوردناست[32]. سلولهایبنیادیمزانشیمی(MSCs)سلولهایچنداستعدادیاستکهمیتوانندتبدیلبهسلولهایاستخوانی،غضروفی،فیبروبلاست،عضلانیوغیرهشوند[7].سلولهایبنیادیرامیتوانازمنابعمختلفازجملهمغزاستخوان،[28]درم،[14]پالپدندان،[17]سینوویوم،[15]ودندانشیریبهدستآورد[29].سلولهایبنیادیبافتچربیدارایقدرتتمایزیبهسمتسلولهایمزودرمیمانندچربی،غضروفی،استخوانیوغیرهمیباشند[9-15]. امروزهدرمهندسیبافت،داربستهایزیستتخریبپذیربهعنوانبستریبرایسلولهایبنیادینساختهمیشود[18-20].درمواردیکهقسمتوسیعیازاستخوانمثلادرتروماهاازبینمیرودازپیوندسلولهایMSCsبهتنهائییادرترکیبباموادزیستتخریبپذیراستفادهمیشود[11].درمطالعهایکهبررویبیمارانداراینقصاستئوژنزانجامشدنشاندادکهدربیمارانیکهبهآنهاپیوندسلولهایمزانشیمیزدهشدنهتنهاهیچپاسخایمنیمنفیایجادنگردیدبلکهمیزانمعدنیشدناستخواندراینافرادافزایشقابلملاحظهایداشتهاست[21].KyungheeLeeوهمکاران(2010)پسازپیوندhASCs(سلولبنیادیمشتقازچربیانسانی)جهتترمیمنقصاستخواننشاندادندکهترشحعواملمختلفاستخوانساز،ازجملهفاکتوررشدکبدیو تحقیقحقیقتوهمکاران(2011)نیزنشاندادکهاسفادهازسلولهایبنیادیمشتقازچربیبرایدرمانضایعاتاستخوانمانیبولدرسگمیتواندمفیدواقعشود[19].یافتههایB.Niechodaوهمکاراندرسال2000نیزنشاندادکهترمیمنقصاستخوانرانگوسفندبااستفادهازسلولهایمزانشیمیمشتقازچربیوسلولهایمزانشیمیمشتقازمغزاستخوانهمراهباداربستهیدروکسیاپاتیتسببافزایشسرعتترمیماستخوانهایتحتدرمانگردیدهاستگرچهمیزانترمیمنقصاستخواندرگروهدرمانشدهباسلولهایADSCsدرمقایسهباگروهدرمانشدهباسلولهایBMSCsافزایشقابلملاحظهایداشتهاست[4]. هدفازتحقیقحاضربررسیترمیمنقصجزئیاستخوانتوسطداربستسلولهایبنیادیمشتقازچربی(ADSCs)همراهباغشاءژلاتین–کیتوساندرموشصحراییبااستفادهازروشهایهیستومورفومتریکوایمونوهیستوشیمیمیباشد.
موادوروشها - حیوان: دراینپژوهشاز60سرموشصحرائینروبالغباوزنحدود250-200گرمنژادالبینو-ویستاراستفادهشد.خوراکدامموشهابصورتحبهبههمراهآبوبصورتآزاددردسترسموشهاقرارگرفت.دمایحیوانخانهحدود2±22وروشناییآنبهطورمتناوبدورهروشناییوتاریکی12ساعتهودرشرایطمطلوبواستانداردحیوانخانهدانشگاهعلومپزشکیبقیهاللهنگهداریشدند.نگهداریحیواناتآزمایشگاهیمطابقباراهنمایانستیتویملیسلامتانجامشده‌است.حیواناتبهطورتصادفیبهپنجگروهتقسیمشدند.1-گروهشاهد(Control)شاملحیواناتیکهبررویاستخوانفمورپایراستشاندرناحیهفوقانیاپیفیزدیستالسوراخیبهصورتدوطرفهایجادنمودهوهیچدرمانیدریافتنکردند.2-گروهشم(Sham)گروهیکه72ساعتبعدازایجادآسیب،50میکرولیترازمحیطکشتدرمحلنقصاستخوانتزریقشد.3-گروه(ژلاتین–کیتوسان)کهپسازایجادنقصاستخوانفموروگذشت3روزپیوندغشاءِژلاتین-کیتوساندرمحلآسیبانجامگردید4-گروهسلول((ADSCsکه72ساعتبعدازایجادنقصاستخوانیتعداد150/000سلولADSCsبصورتغیراتولوگودرمحلآسیبتزریقشد5-گروهسلول-غشاء(ADGC)کهنقصاستخوانیدرفمورایجادنمودهو3روزبعد150/000سلولبنیادیمشتقازچربیبههمراهغشاءِژلاتین-کیتوساندرمحلآسیبپیوندمیگردد.
- روشتهیهغشاء: ابتداکیتوزان(Ch)بانسبت1%وزنیبهمحلولآبمقطر2بارتقطیرکهبادرجهحرارت40درجهسانتیگراداضافهشدمحلولحاصلبوسیلهیبوسیلهدستگاههمزنمخلوطشد.سپسمیزان0/5میلیلیتراسیداستیکخالصبهآناضافهوژلاتینبانسبت1%وزنیبهآناضافهوبهدمایجوشرساندهشد.محلولحاصلبوسیلهیاتوکلاواستریلگردید.
- استخراجسلول: ازحفرهشکمیحیوانچربیبرداشتهشدوپسازخردشدن،با40λکلاژناژو2میلیلیترمحیطکشتαMEMمخلوطگردیدوبهمدت30تا15دقیقهبوسیلهدستگاههمزنبههمزدهشدتازمانیکهیکمحلولکاملاًشیریرنگبهدستآمد.محلول،ازفیلترمش70میکرومتریعبوردادهوبهدنبالآندوباربهمدت4دقیقهوبادور3000،سانتریفیوژشدمحلولرویی،دورریختهشدوترکیبباقیمانده،بامحیطکشتمخلوطگردیدودریکپلیتریختهوسپسداخلانکوباتورقرارگرفت.بهمدت3روز،محیطروییتوسطسمپلرکشیدهشدوبهآنمحیطکشتجدیداضافهگردید.تاسلولهابهکفپلیتبچسبند.بعدازپاساژدوم،سلولهاآمادهپیوندشدند.
- مرحلهکشتسلولADSCبررویغشاءکیتوسانژلاتین: پسازتهیهغشاءوقراردادنقطعات1×1
- ایجادنقصاستخوانی: حیواناتبهوسیلهمخلوطکتامینهیدروکلرید
- نمونهبرداریازحیوانات: موشها28روزبعدازجراحیدومبااستفادهازدوزبالایکلروفورمکشتهشدهوپسازبرداشتناستخوانها،ارزیابیهایهیستومورفومتریکوایمونوهیستوشیمیبررویآنهاصورتگرفت.
- -شمارشسلولیوبررسیمیزانزندهبودنسلولها((Viabilitytest: برایمشخصکردنزندهبودنسلولها،بهنسبتمساویحجمیازسوسپانسیونسلولیوتریپانبلو(4/0درصد)بررویلامنئوبارریختهوسلولهایزندهومردهتوسطمیکروسکوپاینورتبابزرگنمایی٤٠٠بررسیوشمارشگردیدندوازآنجائیکهسلولهایمردهتوسطتریپانبلوبهرنگآبیدر
- مشخصنمودناستروماییبودنسلولهایADSCsبااستفادهازروشایمونوسایتوشیمی: برایتعییندرصدخلوصسلولهایاسترومائی،بهدلیلوجودگلیکوپروتئینفیبرونکتینوCD44درسلولهایبامنشأمزانشیمی،سلولهایADSCsبرعلیهاینگلیکوپروتئینهابهروشایمونوسایتوشیمیرنگشدند[3].بدینمنظورابتداسلولهایADSCsموجوددرپلیتتوسطپارافرمالدئید٤درصدبهمدت٣٠دقیقهفیکسشده،سپسشستشویسلولهاباPBSسهباروهربار٥دقیقهانجامشد.نمونههادرمعرضمحلولبلوککننده(مخلوطسرمبز١٠درصدوTritonX-100درصد3/0)بهمدتیکساعتقراردادهشد.پسازرقیقنمودن(1:100)آنتیبادیهایاولیهCD44و(AB-CAM)Fibronectinکههردوازنوعموشیبودند،هرکدامرابهطورمجزابررویسلولهاریختهوپلیترادرداخلظرفمرطوببهمدتیکشبودردمای°C4انکوبهشدند.پلیتهاپسازشستشوباPBSدرمعرضH2O210درصدبهمدت۳۰دقیقهقرارگرفتند.سپسباPBSسهبارشستشوانجامشدوبهمدتدوساعتدردمایمحیطدرمعرض
- مطالعههیستومورفومتری: جهتبررسیمیزانترابکولاموجوددرمحلکالاستخوانیازمجموعهسختافزاری(کامپیوترومیکروسکوپمتصلبهدوربین(TsviewوسیستمنرمافزاریMoticاستفادهشد.بدینترتیبکهازهرنمونهاستخوانپسازکلسیمزداییبااسیدفرمیک۱۰درصدوفیکساسیونوپردازشبافتی،مقاطعطولیسریالی5میکرونیازنمونههاتهیهوبانسبت۱به۴تعداد۷مقطعازناحیهکالتهیهورنگآمیزیهماتوکسیلین-ائوزینانجامگردیدجهتمطالعههیستومورفومتری،ازمقاطعبافتی،تصاویربابزرگنمائی100برابرتهیهومیزانترابکولاهاوبافتهمبندیعروقیدرمساحتیبرابربا50000میکرومترمربعاندازهگیریوثبتگردیدند.
- شمارشسلولی: تعداداستئوسیتهایموجوددرتیغههایاستخوانیدرسطحیمعادل50000میکرومترمربعبابزرگنمائی٤٠٠برابرمحاسبهوثبتگردیدند. تجزیهوتحلیلاطلاعات:ارزیابیآماریدادههابااستفادهازآزمونآماریANOVAوآزمونتکمیلیTukeyPostHockانجامشد.درانجامآزمونهایآماریازنرمافزارSPSSاستفادهگردید.کلیهاطلاعاتارائهشدهبرحسبMean±SEMمیباشد.میزان
نتایج - زندهبودنسلولها نتایجviabilitytestنشاندادکهتقریباًبیشاز88درصدسلولهایADSCsپسازپاساژچهارمزندهبودند.
- درصدسلولهایADSCsبااستفادهازروشایمونوسیتوشیمی: قبلازپیوندسلولهایADSCsدرصدسلولهاینشاندارشدهباآنتیبادیهایفیبرونکتینوCD44بررسیوبهترتیببیشاز۹3و۹۵درصدمشخصگردیدند(تصویر1).
- هیستومورفومتریبافتاستخوان: اندازهگیریمساحتترابکولاهایاستخواندرناحیهکالنشاندادکهوسعتناحیهترمیمشدهنسبتبهوسعتکلناحیهکالاستخوانیدرگروههایشاهد(023/0±70/0)،شم(020/0±699/0)،غشاء(014/0±86/0)،سلول(017/0±84/0)وسلول-غشاء(011/0±86/0)بودهاست.
تصویر۱:تصویرمیکروسکوپیسلولهایاستروماییپسازانجامایمونوسیتوشیمیبابزرگنمایی۴۰۰برابر.تصویر(A)،(B)،(C)بهترتیبمربوطبهآنتیبادیفیبرونکتین،CD44وکنترلمنفیسلولهایADSC24ساعتپسازپاساژچهارماست.سلولهادرتصاویرAوBبهدلیلدارابودننشانگرهایفیبرونکتینوCD44رنگDABگرفتهوبهرنگقهوهایدیدهشوند.
تصویر2-تصاویرمقاطعبافتاستخوانیمنطقهترمیمشدهمربوطبهگروههایشاهد(A)،شم(B)،غشاء(C)،سلولدرمانی(D)وسلول-غشاء(E)درپایانهفتهچهارم.ترابکولاراستخوان(TR)،فضاهایپیوندیعروفی.(CO)(رنگآمیزی،H&EبزرگنمائیX١٠٠(
مساحتترابکولاهایاستخوانیگروهشمدرمقایسهباگروهشاهدتفاوتمعنادارینشاننداد.ولیاینمساحتدرسهگروهغشاء،سلولوسلول-غشاءنسبتبهگروهشاهددارایافزایشمعناداربودهاست(درهرسهگروهP<0/001).کهبیانگرافزایشقابلتوجهمیزانترابکولاهایاستخوانینسبتبهمساحتکلناحیهکالدرسهگروهغشاء،سلولوسلول-غشاءمیباشد.میانگینمساحتترابکولاهایاستخوانیدرسهگروهغشاء،سلولوسلول-غشاءنسبتبهگروهشمافزایشمعنادارینشاندادهاست(P<0/001).همچنینمساحتترابکولاهایاستخوانیدرگروههایسلولوسلول-غشاءنسبتبهگروهغشاءاختلافمعناداریرانشاننداد.علاوهبرآنمیزانترابکولاهایاستخوانیشکلگرفتهدرناحیهکالدرگروهسلول-غشاءنسبتبهگروهسلولتفاوتمعنادارینداشتهاست(نمودار1). بررسیبافتهمبندی-عروقیدرناحیهنقصاستخوانینشاندادکهمیانگینوسعتبافتهمبندی-عروقینسبتبهوسعتکلناحیهکالدرگروههایشاهد(02/0±3/0)،شم(02/0±3/0)،غشاء(014/0±14/0)،سلول(017/0±15/0)وغشاء-سلول(011/0±13/0)بودهاست. مقایسهاینشاخصبینگروههایشاهدوشمهیچاختلافمعنادارینشاننداد،درصورتیکهاینشاخصدرهرسهگروهغشاء،سلولوسلول-غشاءنسبتبهگروهشاهدکاهشمعناداریرانشانداد(درهرسهP<0/001).بههمینترتیبمشاهدهگردیدکهمیانگیننسبتبافتهمبندی-عروقیبهکلناحیهکالدرهرسهگروهغشاء،سلولوسلول-غشاءدرمقایسهباگروهشمکاهشمعناداریداشتهاست(درهرسهP<0/001)،کهنشاندهندهکاهشقابلتوجهبافتهمبندی-عروقینسبتبهکلناحیهکالدرهرسهگروهمیباشد.درادامهبررسیهامشخصشدکهمیانگیننسبتبافتهمبندی-عروقیبهکلناحیهکالدرگروههایسلول،سلول-غشاءنسبتبهگروهغشاءفاقداختلافمعناداربودهاست.علاوهبرآنمیانگیننسبتبافتهمبندی-عروقیبهکلناحیهکالدرگروهغشاء–سلولنسبتبهگروهسلولتفاوتمعنیداریملاحظهنگردید(نمودار2).
نمودار1-میانگینمساحتترابکولاهایاستخواننسبتبهمساحتکلناحیهترمیمشدهدرمحلنقصبرحسبمیکرومترمربعدرچهارهفتهبعدازپیوند.میانگینمساحتترابکولاهایاستخواننسبتبهمساحتکلناحیهترمیمشدهدرمحلنقصبرحسبمیکرومترمربعدرچهارهفتهبعدازپیوند.گروهشاهدوشمتفاوتمعنیداریرابایکدیگرنشاننمیدهند. *اختلافمعنیدارباگروهشاهد(P<0/05)
نمودار2-میانگیننسبتمساحتبافتهمبندی-عروقیاستخوانبهمساحتکلناحیهترمیمشدهدرمحلنقصبرحسبمیکرومترمربعدرچهارهفتهبعدازپیوند.ایننسبتدرگروهشاهدوشماختلافقابلتوجهینداشتند. *اختلافمعنیدارباگروهشاهد(P<0/05)
- تعداداستئوسیتها: بررسیوشمارشتعداداستئوسیتهادرسطحیبرابر50000میکرومترمربعازترابکولاهایناحیهنقصاستخوانیبابزرگنمایی400برابردرگروههایمختلفنشاندادکهمیانگینتعداداستئوسیتهادرگروههایشاهد(82/16±47/72)،شم(9/2±24/55)،غشاء(25/10±62/51)،سلول(74/3±78/25)،سلول-غشاء(98/0±88/32)بود.ایننتایجنشاندادکهمیانگینتعداداستئوسیتهادرگروههایشموغشاءنسبتبهگروهشاهدکاهشغیر معنادارودرگروهسلولوسلول-غشاءکاهشمعناداربودهاست(درهردوگروه001/0P<)،ضمناینکهمیانگینتعداداستئوسیتهادرگروهغشاء،سلولوسلول-غشاءدرمقایسهباگروهشمدارایاختلافمعنادارنبودهاست.همچنینمیانگینتعداداستئوسیتهادرگروهسلولوسلول-غشاءنسبتبهگروهغشاءءکاهشغیرمعنادارداشتهامامیانگینتعداداستئوسیتهادرگروهسلول-غشاءدرمقایسهباگروهسلولافزایشغیرمعنیدارنشاندادهاست(تصویر2)(نمودار3).
نمودار3-تعداداستئوسیتهادر50000میکرومترمربعازترابکولایاستخواندرمحلآسیبچهارهفتهبعدازپیوند. میانگینتعداداستئوسیتهامیانگروههایشاهد،شموغشاءفاقداختلافمعنیداربود. *اختلافمعنیدارباگروهشاهد(P<0/05)
تصویر2-تصاویرناحیهنقصاستخوانیفمورکهنشاندهندهتعدادوآرایشاستئوسیتهادرگروههایمختلفمیباشد.گروهشاهد(A)،
- ردیابیسلولهایتزریقشدهبهروشایمونوهیستوشیمی درپایانهفتهچهارمازناحیهنقصاستخوانیازگروههایمختلفمقاطعپارافینیبهضخامت5 میکرومترتهیهگردیدووجودسلولهاینشاندارشدهموجوددرمحلترمیماستخوانبااستفادهازروشایمنوهیستوشیمیوبهرهگیریازآنتیBrduردیابیوتاییدگردیدند(تصویر3).
تصویر3-سلولهایردیابیشدهADSCچهارهفتهبعدازپیوندسلول.پیوندغشاء(A)،پیوندسلول(B)،پیوندسلول-غشاء(D)وکنترلمنفی(C)بابزرگنمائی100برابر.پیکانسیاهاشارهبههستهسلولهاینشاندارداردکهدرAوBوDبهرنگقهوهایدیدهمیشودامادرCرنگنگرفتهوبهرنگبنفشدیدهمیشود.
بحث امروزهازﺳﻠﻮلﻫﺎیﺑﻨﻴﺎدیﻣﺰاﻧﺸﻴﻤﻲمشتقازﺑﺎﻓﺖچربیونیزدارﺑﺴﺖهایزیستتخریبپذیرجهتترمیمنقائصاستخوانیاستفادهمیشود[10]. یافتههایهیستومورفومتریاینتحقیقچهارهفتهبعدازپیوندبیانگرافزایشمساحتترابکولاهایاستخوانیوکاهشبافتهمبندی-عروقیدرگروهایپیوندسلولنسبتبهگروهشاهدبودهاست.تعداداستئوسیتهادرناحیهترمیمدرگروههایپیوندسلولوسلولغشاءنسبتبهگروهشاهدکاهشمعنیدارینشانداد.درتحقیقحاضربهنظرمیرسدکهدرگروهتجربیبهدلیلکشتسلولهادرمحیططبیعیومناسبترمیماستخوانیبهترانجامشدهاستامادرگروهشاهدبهعلتمحیطاسیدیوکمبوداکسیژنسلولهایاتوژنوساستخوانیبهزمانبیشتریبرایتکثیروترمیمنیازداشتندوبههمیندلیلنسبتگروهپیوندسلولازترمیمضعیفتریبرخورداربودهاند[3]. مشابهنتایجگروهسلول-غشاءمایافتههایSchliephakeوهمکاران(2009)میباشدزیراایشاننیزبهمنظورافزایشاثربخشیسلولهایبنیادیازداربستکلاژنبرایتمایزوگسترشسلولهایبنیادیاستفادهنمودندکهنتایجخوبیجهتتسریعرشداستخوانبدستآوردند[30].تحقیقاتدیگرینیزنشاندادهاندکهپسازایجادنقصاستخوانیدربزوگوسفندومتعاقبآنپیوندسلولمزانشیمی،میزانترمیمدراستخوانهایگروهتجربیبهطورچشمگیریافزایشیافتهبود[2]. نتایجارزیابیهیستولوژیکنقصاستخوانرادیالخرگوشدرتحقیقKimوهمکاراننیزمشابه همچنینهمسوبایافتههایمامطالعهیLiuBوهمکاران(2009)میباشدکهایشاننیزبرایترمیمنقصاستخوانجمجمهسگازپیونداتولوگسلولADSCsوداربستهایمرجانی(Coral(scaffoldاستفادهنمودند.نتایجاینتحقیقنشاندادکهسلولاتولوگADSCsوداربستهایمرجانیمیتوانندسببترمیمسریعترنقصاستخوانجمجمهدرسگشوندبطوریکهگروهتجربیدارایافزایشمعنیدارنسبتبهگروهشاهدبود[26]،کهبایافتههایهرسهگروهسلول،غشاءوسلول-غشاءتحقیقما،خصوصاباگروهسلول-غشاءمطابقتدارد.مشابهنتایجتحقیقمامطالعاتدیگریدیدهمیشودازجملهتحقیقKyungheeLeeوهمکاران(2010)پسازپیوندhASCs(سلولبنیادیمشتقازچربیانسانی)استکهجهتترمیمنقصاستخوانملاحظهکردندکهترشحعواملمختلفاستخوانساز،مانندفاکتوررشدکبدیوپروتئینهایماتریکسخارجسلولیفعالگردیدهوhASCsدربهبودترمیماستخواننقش موثریراایفانمودهاستکهمیتواندروشسودمندیبرایدرمانپوکیاستخوانبهحسابآید[24].همچنینتحقیقAbukawaوهمکاراندرسال2004بودهاستکهبررویخوکانجامشدهوپیونداتولوگازسلولهایبنیادیمشقازچربیدرخوککهباDاسیدL-لاکتیکگلیکولیککشتدادهوبهفکپاییناسیبدیدهمنتقلگردیدند،بررسیمحلنقصاستخوانینشاندادکهبافتاستخوانیتشکیلشدهدرمحلاسیبدرگروهدرمانینسبتبهگروهشاهدافزایشقابلملاحظهایداشتهاست[1].درتحقیقدیگریکهدرسال2010توسطNatherوهمکاراناوصورتگرفتازپیونداتولوگسلولهایبنیادیمزانشیمیبرایترمیمآلوگرافتنقصاستخوانفموردرخرگوشاستفادهگردیدونتایجآنبهبودوضعیتترمیماستخوانوافزایشسلولهایاستخوانیدرناحیهدیافیزفمورمتعاقبپیوندآلوگرافتبودهاست[27].کهتمامینتایجاینمحققیندرراستاییافتههایتحقیقمانیزمیباشد. همچنیننتایجمثبتیازپیوندسلولهایبنیادیدرترمیمنقصاستخوانیوبااستفادهازداربستساختهشدهتوسطDupontگزارششدهاستگرچهایشاننتوانستندسلولهایبنیادیپیوندزدهشدهرادرمحلترمیماستخوانردیابیوشناساییکنند[13].درتحقیقدیگریکهCaoوهمکارانبررویمدلحیوانیبزهایاستئوپروتیکانجامدادندوازپیونداتولوگسلولهایMSCsبرایدرماناستئوپروزاستفادهکردند.پسازبررسیهایهیستومورفومتریاستخوانهایفموراینحیواناتبعدازشانزدههفتهنشاندادندکهترابکولاهایاستخوانیونیزتعدادترابکولاهادرناحیهنقصاستخوانیدرگروههایتجربینسبتبهگروهکنترلافزایشمعنیداری علیرغماینکهاکثرنتایجبدستآمدهازپیوندسلولهایبنیادینشاندهندهتسریعدرروندترمیماستخوانمیباشدوبسیاریازایننتایجبایکدیگروبایافتههایتحقیقحاضرمشابهتدارندولیدرتعدادیازتحقیقات،نتایجمتفاوتبایافتههایمانیزدیده نتیجهگیری نتایجهیستومورفومتریوایمونوهیستوشیمیتحقیقحاضرنشاندادکهروندترمیماستخواندرمحلنقصجزئیاستخوانیدرموشصحرائی،بااستفادهپیوندغشاءژلاتین-کیتوسانوسلولهایبنیادیمشتقازچربیسببافزایشسرعتترمیموبازسازیاستخوانمیشود. | ||
| مراجع | ||
|
[1] Abukawa H, Shin M, Williams WB, Vacanti JP, Kaban LB, Troulis MJ. 2004.Reconstruction of mandibular defects with autologous tissue-engineered bone. J Oral MaxillofacSurg. ;62:601–6. [PubMed] [2] Arthur, A. Zannettino, A AND Gronthos, S. 2009 .The Therapeutic Applications of MultipotentialMesenchymalStromal Stem Cells in Skeletal Tissue Repair. J. Cell. Physiol., 218: 237–245. [3] Ashton BA, Allen RD, Howlett CR, Eaglesom CC, Hatton A, Owen M. 1980 .Formation of bone andcartilage by marrow stromal cells in diffusion chambers in vivo. ClinOrthopRelatRes;(151):294-307. [4] B. Niechoda,Y. YuandW.R. Walsh .2000. Healing bon with adipose tissue derived stromal stem cells – the histomorfhometry of the ovin defect model. Orthopaedic Research Laboratories, Prince of Wales Hospital, University of New South Wales, Sydney, Australia: [5] Brownlow HC, Simpson AH. 2000.Metabolic activity of a new atrophic nonunion model in rabbits. J OrthopRes May; 18(3):438-42. [6] Bruder SP, Kraus KH, Goldberg VM, Kadiyala S. 1998.The effect of implants loaded with autologous mesenchymal stem cells on the healing of canine segmental bone defects. J Bone Joint Surg Am; 80:985–996. [7] Bunnell BA, Flaat M, Gagliardi C, Patel B, Ripoll C.2008. Adipose-derived stem cells: Isolation, expansion and differentiation.Methods;45:115–20. [8] Cao L, Liu, G. Gan, Y. Zhang, X. Tang, T. Dai, K. et al. (2012). The use of autologous enriched bone marrow MSCs to enhance osteoporoticbone defect repair in long-term estrogen deficient goats. Biomaterials 33و 5076e5084. [9] Cheryl, T., Gomillion, Karen J.L. 2006, Stem cells and adipose tissue engineering. Biomaterials;.27:6052–6063. [10]Choi JH, Gimble JM, Lee K, Marra KG, Rubin JP, Yoo JJ, et al .2010.Adipose tissue engineering for soft tissue regeneration. Tissue EngPart B Rev;16(4):413-26. [11]Crha, M. Nečas, A. Srnec, R. Janovec, J. Stehlík, L. Raušer, P. et al. (2009). Mesenchymal Stem Cells in Bone Tissue Regeneration and Application to Bone Healing. ACTA VET. BRNO, 78: 635-642. [12]De Ugarte DA, Morizono K, Elbarbary A, Alfonso Z, Zuk PA, Zhu M, et al. 2003.Comparison of multi-lineage cells fromhuman adipose tissue and bone marrow. Cells Tissues Organs.; 174(3): 101-9. [13]Dupont KM, Sharma K, Stevens HY, Boerckel JD, García AJ, Guldberg RE. 2010. Human stem cell delivery for treatment of large segmental bone defects. Proc Natl AcadSci U S A. Feb 23;107(8):3305-10. [14]Elahi M, Kabirsoleimani M, Shiravi A. 2011. Investigate the possibility ofusing enzymes to extract mesenchymal stem cells from human adipose tissue. J Med Res;4(35):200-80. [Persian] [15]Fan J, Varshney RR, Ren L, Cai D, Wang DA. 2009. Synovium-derived mesenchymal stem cells: A new cell source for musculoskeletal regeneration. Tissue Eng Part B Rev.;15:75–86. [PubMed]
[16]Gimble JM, Katz AJ, Bunnell BA. 2007. Adipose-derived stem cells for regenerative medicine. Circ Res; 100(9):
[17]Goldberg V.M. and Caplan A.I., 2004.Orthopedic Tissue Engineering, Marcel Dekker, New York, Chap. 1.
[18]Habraken, W., J. G. C. Wolke, and J. A. Jansen, 2007. Ceramic composites as matrices and scaffolds for drugdelivery in tissue engineering. Advanced drug delivery reviews,. 59(4): p. 234-248.
[19]Haghighat A, Hekmatian E, Abdinian M, Sadeghkhani E.2011. Radiographic Evaluation of Bone Formation and Density Changes after Mandibular Third Molar Extraction: A 6 Month Follow up.Dent Res J; 8:1–5. [PMC free article][PubMed]
[20]Hollister, S. J. 2005. Porous scaffold design for tissue engineering. Nature materials, 4(7): p. 518-524.
[21]Hong SR, Lee SJ, Shim JW, Choi YS, Lee YM, Song KW, et al. 2001. Study on gelatin-containingartificial skin IV: A comparative study on theeffect of antibiotic and EGF on cell proliferationduring epidermal healing. Biomaterials; 22(20): 2777-83
[22]Huang Y, Onyeri S, Siewe M, Moshfeghian A,Madihally SV. 2005. In vitro characterization ofchitosan-gelatin scaffolds for tissue engineering.Biomaterials; 26(36): 7616-27.
[23]Kim KM, Evans GRD. 2005. Tissue Engineering: The Future of Stem Cells. In: Ashammakhi N, Reis RL, editors. Topics in tissue engineering.
[24]Kyunghee Lee, Hyunsoo Kim, Jin-Man Kim, Jae-Ryong Kim, Keuk-Jun Kim,Yong-Jin, Se-Il Park, Jae-Ho Jeong, Young-mi Moon, Hyun-Sook Lim, Dong-Won Bae, Joseph Kwon, Chang-Yong Ko, Han-Sung Kim, Hong-In Shin, DaewonJeong.(2011), Systemic transplantation of human adipose-derived stem cells stimulates bone repair by promoting osteoblas and osteoclast function,Journal of Cellular and Molecular Medicine,J. Cell. Mol. Med. Vol 15, No 10, 2011
[25]Liao D, Gong P, Li X, Tan Z, Yuan Q. 2010. Co-culture with Schwann cells is an effective way for adipose-derived stemcells neural transdifferentiation. Arch Med Sci.; 6(2): 145-51.
[26]Liu B1,Cui L,Liu GP,Cao YL,Zhu JT,Cao Y. )2009(,Tissue-engineering bone with ADSCs and coral scaffold for repairing of cranial bone defect in canine.Zhonghua Zheng Xing Wai KeZaZhi.2009. May;25(3):204-8.
[27]Nather A, David V, Teng JW, Lee CW, Pereira BP. 2010. Effect of autologous mesenchymal stem cells on biological healing of allografts in critical-sized tibial defects simulated in adult rabbits. Ann Acad Med Singapore. Aug;39(8):599-606.
[28]Nichol JW, Khademhosseini A. 2009. Modular Tissue Engineering: EngineeringBiological Tissues from the Bottom Up. Soft Matter;5(7):13129.
[29]Olszta, M. J., Olszta, M. J., Cheng, X., Jee, S. S., Kumar, R., Kim, Y. Y., Kaufman, M. J., Douglas,. P., Gower, L. B., 2007. Bone structure and formation: A new perspective. Materials Scienceand Engineering: R: Reports,. 58(3): p. 77-116.
[30]Schliephake H, Zghoul N, Jager V, van Griensven M, Zeichen J, Gelinsky M, et al. 2009. Bone formation in trabecular bone cell seeded scaffolds used for reconstruction of the rat mandible.Int J Oral Maxillofac Surg.;38:166–72.[PubMed]
[31]Stockmann, Ph. Park, J. Wilmowsky, v. Nkenke, C. Felszeghy, E. Friedrich, J. et al. 2012 .Guided bone regeneration in pig calvarial bone defects using autologous mesenchymal stem/progenitor cells e A comparison of different tissue sources. Journal of Cranio-Maxillo-Facial Surgery, 40; 310e320.
[32]Wilson, ADH., Hart, A., Brannstrom ,T., Wiberg ,M., Terenghi, G., 2003,Primary sensory neuronal rescue with systemicacetyl-L-carnitine following peripheral axotomy, A dose-response analysis, British Journal of PlasticSurgery, 56:732-739.
[33]Yoshimura H, Muneta T, Nimura A, Yokoyama A, Koga H, Sekiya I. 2007;Comparison of rat mesenchymal stem cellsderived from bone marrow, synovium, periosteum, adipose tissue, and muscle. Cell Tissue Res. 327(3): 449-62.
| ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 367 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 233 |
||