بررسی و مقایسه میزان مهار ژن CERB با استفاده از دو siRNA اختصاصی آن در رده سلولی HeLa

فصلنامه زیست شناسی جانوری

مقاله 4، دوره 1، شماره 1، آذر 1387   

نویسندگان

زهرا دیلمی خیابانی¹؛ مهدی بنان²؛ علی محمد اصغریان³؛ جلال قره سوران⁴؛ غلامرضا جوادی⁵؛ کیمیا کهریزی⁶؛ حسین نجم آبادی⁷

¹1- دانشجوی Ph.D سلولی مولکولی، گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات تهران.

²استادیار، مرکز تحقیقات ژنتیک، دانشگاه علوم بهزیستی و توانبخشی

³گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تنکابن

⁴عضو هیئت علمی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تبریز

⁵دانشیار، گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم وتحقیقات

⁶دانشیار، مرکز تحقیقات ژنتیک، دانشگاه علوم بهزیستی و توانبخشی

⁷استاد، مرکز تحقیقات ژنتیک، دانشگاه علوم بهزیستی و توانبخشی

چکیده

پروتئین CREBیک فاکتور مهم پایین دست بسیاری از مسیرهای سیگنالی به شمار می رود. با داشتن siRNAکارآمد برای ژن CREBمی توان مسیر های سیگنالی بسیاری از داروها را در سلول های مختلف بررسی نمود. در این تحقیق میزان مهار بیان ژن CREBبا بکارگیری دو siRNA مختلف برای این ژن در سلول های HeLaمورد بررسی قرار گرفت. جهت بررسی میزان مهاری دو siRNACREB، سلول های HeLaبا روش Lipofection ترانسفکت شدند. استخراج RNAوسنتز cDNAصورت گرفته، بررسی اثر مهاری بیان ژن CREBبا استفاده از Relative Quantitative Real time PCRانجام گرفت طبق نتایج به دست آمده یکی از siRNAها اثر مهاری بالایی برروی بیان CREBدر سلول های HeLaنشان داد، و بیان ژن CREB، 5/64درصد در این سلول ها کاهش یافت. بر اساس نتایج این تحقیق، siRNACREBبا کارایی بالا توانست اثر مهاری را در سلول های HeLaنشان دهد.با استفاده از siRNAکارآمدی که در این تحقیق جهت مهار ژن CREBطراحی و در سلول های HeLaاستفاده گردید، می توان از CREB siRNAدر سلول های دیگر جهت بررسی مسیر سیگنالی نیز استفاده نمود.

کلیدواژه‌ها

پروتئین CREB؛ Sirna؛ سلول های HeLa