تعداد نشریات | 418 |
تعداد شمارهها | 9,997 |
تعداد مقالات | 83,560 |
تعداد مشاهده مقاله | 77,801,285 |
تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 54,843,918 |
کلونینگ و بیان ژن VP3 ویروس بیماری بورس عفونی دراشرشیاکولی و تخلیص پروتئین VP3 نوترکیب | ||
نشریه علمی میکروبیولوژی دامپزشکی | ||
مقاله 10، دوره 12، شماره 1 - شماره پیاپی 32، شهریور 1395، صفحه 91-100 اصل مقاله (536.02 K) | ||
نوع مقاله: مقاله پژوهشی (اصیل) | ||
نویسندگان | ||
مسعود رضا صیفی آباد شاپوری* 1؛ مسعود قربانپور1؛ علی محبت2؛ محمد رشنو3؛ غلامرضا دهنوی زاده کازرونی4 | ||
1گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی ، دانشگاه شهید چمران اهواز | ||
2دانشجوی دکتری تخصصی میکروبیولوژی، دانشکده دامپزشکی ، دانشگاه شهید چمران اهواز | ||
3دانشجوی دکتری تخصصی، دانشکده دامپزشکی ، دانشگاه شهید چمران اهواز | ||
4دانشآموخته دکترای دامپزشکی، دانشگاه شهید چمران اهواز | ||
چکیده | ||
بیماری بورس عفونی یا گامبورو ، یکی از بیماریهای ویروسی بسیار واگیر طیور است که در صنعت طیور در سراسر جهان باعث زیانهای اقتصادی میشود. از آنجاییکه که پس از عفونت با ویروس بیماری بورس عفونی (IBDV) اولین آنتیبادیها بر ضد پروتئین ساختمانی VP3 تولید میشوند، این پروتئین آنتی ژن مناسبی برای استفاده در الیزا میباشد. باتوجه به دشوار بودن تهیه VP3 طبیعی از IBDV یا سلول های آلوده به ویروس، VP3 نوترکیب بیان شده در اشرشیاکولی می تواند آنتیژن مطلوبی برای این منظور محسوب شود. مطالعه حاضر با هدف کلونینگ ژنVP3 سویه ویروس واکسن D78 در پلاسمید pMal-C2X (یک پلاسمید بیانی پروکاریوتی) و بیان و خالص سازی پروتئین نوترکیب انجام گردید. بنابر این ژن VP3 با آزمایش RT-PCR تکثیر داده شده و پس از هضم با آنزیم های محدودگر مناسب در پلاسمید pMal-C2X کلون گردید. پس از تعیین توالی و اطمینان از کلونینگ موفق این ژن، بیان پروتئین نوترکیب با آزمایش SDS-PAGE تایید گردید. در ادامه پروتئین نوترکیب با استفاده از ستون کروماتوگرافی حاوی رزین آمیلوز خالص شد. بررسی واکنش پروتئین VP3 نوترکیب در آزمایش ایمونوبلاتینگ نشان داد که پروتئین تولید شده از نظر آنتی ژنی فعال می باشد. با توجه به راندمان بالای تولید در این سیستم، پروتئین بیان شده کاندیدای مناسبی برای طراحی آزمایش الیزا و سنجش تیتر آنتی بادی علیه ویروس بیماری بورس عفونی می باشد. | ||
کلیدواژهها | ||
ویروس بیماری بورس عفونی (IBDV)#پروتئین VP3 #کلونینگ#پلاسمید pMal-C2X | ||
آمار تعداد مشاهده مقاله: 190 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 146 |