بررسی نقش TNF-αدر تغییر الگوی بیان ژن CXCR4 در سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از مغز استخوان انسان

مجله پلاسما و نشانگرهای زیستی

مقاله 1، دوره 7، شماره 3 - شماره پیاپی 26، مهر 1393   

نویسندگان

رزیتا ضیایی¹؛ مریم آیت اللهی²؛ رامین یعقوبی³؛ زینب صحرائیان⁴؛ نصرت الله ضرغامی⁵

¹دانشگاه علوم پزشکی تبریز، شعبه بین الملل ارس. جلفا. ایران.

²دانشیار، دانشگاه علوم و پزشکی شیراز، مرکز تحقیقات پیوند و ترمیم اعضاء بیمارستان نمازی، شیراز. ایران

³دانشیار، دانشگاه علوم و پزشکی شیراز، مرکز تحقیقات پیوند و ترمیم اعضاء بیمارستان نمازی، شیراز. ایران.

⁴دانشگاه آزاد اسلامی، ,واحدزنجان. گروه میکروبیولوژی ، زنجان .ایران.

⁵ستاد، دانشگاه علوم پزشکی تبریز ، دانشکده علوم نوین، تبریز، ایران.

چکیده

مقدمه و هدف:مهاجرت و جایگزینی سلول در پیوند سلول مهم است و گیرنده CXCR4نقش کلیدی در این فرآیند دارد. سلول های بنیادی مزانشیمی (MSCs) قادر به بیان CXCR4نیستند اما تحریک آن ها با سایتوکاین های التهابی نظیر TNF-αمیزان بیان CXCR4را افزایش می دهد. در این مطالعه میزان تغییر بیان CXCR4در MSCsمغز استخوان انسان تحت تاثیر سایتوکاین التهابیTNF-α  مورد بررسی قرار گرفت.روش کار:MSCsمورد مطالعه به دو گروه مورد و شاهد تقسیم شدند. گروه شاهد سلول هایتیمار نشده و گروه های مورد،سلول های تیمار شده با TNF-αبا غلظت های ng/ml1و10 در زمان های 2، 10، 24 و 48 ساعت بود. سپس mRNAی سلول ها استخراجو cDNAآن ساخته و میزان بیان ژن CXCR4با روش Real Time PCRبررسی گردید. ژن کنترل خانگی، بتا اکتین بود. نهایتاً تغییر بیان در سلول های تیمار شده و تیمار نشده با استفاده از روش لیواک ( -∆∆Ct2) تجزیه و تحلیل شد. یافته ها:در MSCsتیمار شده با ng/ml1 TNF-αدر زمان­های 2، 10، 24 و 48 ساعت میزان بیان به ترتیب:32، 64، 256 و 32 برابر و در تیمار با ng/ml10 در زمان های مشابه، به ترتیب: 16، 32، 512 و 32 برابر شد. بیشترین میزان بیان ژن CXCR4در مجاورت با TNF-αدر مدت زمان 24 ساعت و در غلظت ng/ml10مشاهده گردید.نتیجه گیری:به نظر می رسد هم عامل زمان و هم غلظت TNF-αدر بیان ژن CXCR4در MSCsمشتق از مغز استخوان انسان موثر است ولی زمان عامل مهمتری در تغییر بیان ژن CXCR4در این سلول هاست.

کلیدواژه‌ها

سلول های بنیادی مزانشیمی؛ گیرنده کموکاینی CXCR4؛ فاکتور نکروز دهنده تومورα؛ الگوی بیان ژن