ردیابی مولکولی ویروس مارک در ماکیان خانگی با ضایعات ندولی در ارگان‌های احشایی

آسیب‌شناسی درمانگاهی دامپزشکی

مقاله 4، دوره 13، 2 (50) تابستان، مرداد 1398، صفحه 151-161   

نوع مقاله: مقاله علمی پژوهشی

شناسه دیجیتال (DOI): 10.30495/jvcp.2019.666729

نویسندگان

مجید غلامی آهنگران^{* 1}؛ الهام مقتدایی²؛ آسیه احمدی³

¹دانشیار گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران.

²استادیار گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران.

³استادیار گروه صنایع غذایی، واحد اردستان، دانشگاه آزاد اسلامی، اردستان، ایران.

چکیده

بیماری مارک یکی از بیماری­های مهم تضعیف­کننده سیستم ایمنی در صنعت پرورش مرغ تخم­گذار است که می­تواند ضایعات لنفوپرولیفراتیو در اندام­های مختلف احشایی ایجاد کند. شناسایی هر چه سریع­تر این بیماری در طیور تخم­گذار مانع از صرف هزینه‌های درمانی و تصمیم‌گیری سریع در خصوص اقدامات کنترلی و امنیت زیستی علیه این بیماری می­گردد. در این راستا به منظور شناسایی ویروس مارک در ضایعات ندولی در احشای ماکیان خانگی و تمایل بافتی ویروس مارک، از 50  قطعه پرنده مشکوک به بیماری مارک که دارای ضایعات ندولی در احشاء بودند، نمونه­­های مختلف بافتی ضایعه­دار و بدون ضایعه اخذ شد. پس از استخراج  DNA از نمونه­های بافتی، بر اساس توالی آنتی­ژن A، یک قطعه با اندازه 314 جفت بازی با پرایمرهای اختصاصی و با استفاده از آزمایش PCR (polymerase chain reaction) تکثیر شد و به شناسایی موارد آلوده و توزیع بافتی ژن کدکننده آنتی­ژن A ویروس مارک در تمامی نمونه­ها پرداخته شد. علاوه بر آن، به منظور تفریق سویه‌های بیماری­زا از غیر بیماری­زا، قطعه 434 جفت بازی تکرارشونده نیز با استفاده از جفت پرایمر اختصاصی تکثیر شد. نتایج نشان داد در تمامی موارد آلوده به ویروس مارک، در مرحله تومورزایی، ژن کدکننده آنتی ژن A در بافت­های ضایعه­دار و بدون ضایعه قابل ردیابی است. علاوه بر آن، تمامی نمونه‌های مثبت از نظر ویروس مارک، متعلق به پاتوتیپ­های بیماری­زا می‌باشند. لذا به­نظر می‌رسد که در مرحله تومورزایی بیماری مارک، صرف نظر از وجود یا عدم وجود علایم ماکروسکوپی در لاشه پرندگان، در تمامی بافت­ها ژن کدکننده آنتی ژن­A  ویروس مارک قابل ردیابی است.
 

کلیدواژه‌ها

ویروس مارک؛ ضایعات ندولی؛ ردیابی مولکولی‌؛ ماکیان خانگی

مراجع

• Balena, V., Reddy, M.R., Singh, R., Kumar M., Palanivelu M., Karikalan M., et al. (2019). Identification of very virulent marek’s disease virus strains in India by sequence analysis of 132 bp repeats of BamH-HI region. Indian Journal of Animal Research, (In press).
• Bancroft, J.D. and Stevens, A. (1996). Theory and Practice of Histopathological Techniques. UK: London, Churchill livingstone, pp: 100-110.
• Becker, Y., Asher, Y., Tobar, E., Davidson, I., Malkinson, M. and Weisman, Y. (1992). PCR for differentiation between pathogenic and non-pathogenic serotype 1 Marek disease virus and vaccine viruses of MDV-serotype 2 and 3. Journal of Virological Methods, 40(3): 307-322. 
• Boodhoo, N., Gurung, A., Sharif, S. and Behboudi, S. (2016). Marek’s disease in chickens: a review with focus on immunology. Veterinary Research, 47(2): 119. 
• Davidson, I. and Borenstein. R. (1999). Multiple infections of chickens and turkeys with avian oncogenic viruses: Prevalence and molecular analysis. Acta Virologica, 43: 136-142.
• Doosti, A. and Golshan, M. (2011). Molecular study for detection of Marek’s disease virus (MDV) in southwest of Iran. Scientific Research and Essays, 6(12): 2560-2563.
• Fodor, I., Coman, M. and Catana, N. (2009). An outbreak of Marek’s disease in broiler chickens: Epidemiological, clinical and anatopathological aspects. Lucrari Stinitifice Medicina Veterinara, 2(1): 224-227.
• Kalyani, I.H., Joshi, C.G., Jhala, M.K., Bhanderi, B.B. and Purohit, J.H. (2011). Characterization of 132 bp repeats BamH1-H region in pathogenic Marek’s disease virus of poultry in Gujarat, India, using PCR and sequencing. Indian Journal of Virology, 22: 72-75.
• Kozdrun, W., Samorek-Salamonowicz, E. and Czekay, H. (2001). PCR for the differentiation of Marek,s disease virus strain. Bulletin of the Veterinary Institute in Pulawy, 45(10): 5-10.
• López-Osorio, S., Piedrahita, D., Espinal-Restrepo, M.A., Ramírez-Nieto, G.C., Nair, V., Williams, S.M., et al. (2017). Molecular characterization of Marek's disease virus in a poultry layer farm from Colombia. Poultry Science, 96: 1598-1608.
• Mohammadi, A., Keyvanfar, H., Hemmatzadeh, F. and Bozorgmehri-Fard, M.H. (2005). Molecular detection of Marek disease virus (MDV) in Iran. Iranian Journal of Veterinary Research, 60(2): 125-130.
• Schat, K.A. and Nair, V. (2013). Marek’s Disease. In: Disease of Poultry. Swayne, D.E., Glisson, J.R., McDougald, R., Nolan, L.K, Suarez, D.L. and Nair, V.L. editors. 13th ed., USA: W.B. Publishing, Massachusetts, pp: 517-548.
• Singh, S.D., Barathidasan, R., Kumar, A., Deb, R., Kumar-Verma, A. and Dhama, K. (2012). Recent Trends in Diagnosis and Control of Marek’s Disease (MD) in Poultry. Pakistan Journal of Biological Sciences, 15(3): 964-970.