پیوندهای مفید
اخبار و اعلانات
آمار
| تعداد نشریات | 418 |
| تعداد شماره‌ها | 10,003 |
| تعداد مقالات | 83,617 |
| تعداد مشاهده مقاله | 78,292,028 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 55,346,835 |
ساخت وکتور بیانی با ویژگی تنظیم منفی پایدار مسیر تولید استات در باکتری اشریشیاکلی به وسیله‌ی آنتیسنسRNA | ||
| بیوتکنولوژی و میکروبیولوژی کاربردی | ||
| مقاله 6، دوره 1، شماره 1، زمستان 91، اسفند 1391، صفحه 41-49 اصل مقاله (3.97 M) | ||
| نوع مقاله: Original Article | ||
| چکیده | ||
| یکی از مشکلات استفاده از باکتری اشریشیاکلی برای تولید انبوه پروتئین نوترکیب، ترشح استات در محیط کشت است که سبب کاهش طول عمر باکتری و به دنبال آن کاهش بیان پروتئین نوترکیب میشود. در این مقاله ما از فناوری RNAی آنتیسنس به عنوان ابزاری سودمند در مهندسی متابولیک برای مهار جزئی بیان ژنهای مربوط به دو آنزیم اصلی مسیر استات، یعنی فسفوترانساستیلاز (PTA) و استاتکیناز (ACK)، استفاده کردیم. یک پلاسمید نوترکیب که حاوی ژنهای آنتیسنسی است که هر دو ژن ackA و pta را مورد هدف قرار میدهد، ساخته شد. قطعات مربوط به کاست آنتی سنس در ناقل مورد نظر کلون شده و عملکرد آن با اندازهگیری سطح mRNAی مربوط به هر دوژن با روش RT-PCR و سنجش فعالیت آنزیمهای آن هابا روش واکنشهای جفت شده براون و همکارانش مورد ارزیابی قرار گرفت. بیان کاست، سبب کاهش سطح mRNAی مربوط به هر دوژن و فعالیت آنزیمهای آن ها شد. میزان این کاهش فعالیت در مورد استات کیناز، 17 درصد در مورد فنسفوترنس استیلاز 15 درصد محاسبه شد. با مشاهده این اثر امیدهای تازهای برای جلوگیری از مرگ زودهنگام باکتری و افزایش بازدهی تولید داروی نوترکیب در باکتری اشریشیاکلی به وجود میآید. | ||
| کلیدواژه‌ها | ||
| RNAی آنتیسنس؛ استات؛ پروتئین نوترکیب؛ اشریشیاکلی؛ استات کیناز؛ فنسفوترنس استیلاز | ||
| مراجع | ||
|
| ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 239 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 344 |
||