بررسی اثرات عصاره گیاه زیرفون (Tilia plathyphyllos) بر بیان ژن‌ کاسپاز‌های 3 و 9 در رده سلول سرطانی غدد پستانی سگ (CF41.Mg)

آسیب‌شناسی درمانگاهی دامپزشکی

مقاله 1، دوره 13، 1 (49) بهار، اردیبهشت 1398، صفحه 1-14   

نوع مقاله: مقاله علمی پژوهشی

شناسه دیجیتال (DOI): 10.30495/jvcp.2019.664873

نویسندگان

زهره مستحصن¹؛ سید پژمان مرتضوی^{* 2}

¹دانش‌آموخته دکترای حرفه‌ای دامپزشکی، دانشکده علوم تخصصی دامپزشکی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران.

²دانشیار گروه پاتولوژی، دانشکده علوم تخصصی دامپزشکی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران.

چکیده

سرطان پستان در سگ و گربه بعد از تومورهای پوستی، شایع­ترین نوع سرطان می­باشد. هرگونه اختلال در روند آپوپتوز سبب ایجاد و رشد سلول­های سرطانی می­شود. کاسپازهای 3 و 9 به عنوان کاسپازهای اجرایی و القاگر نقش مهمی در فرآیند آپوپتوز دارند. این مطالعه به منظور بررسی اثر عصاره گیاه زیرفون بر بیان ژن کاسپاز­های 3 و 9 در رده سلول سرطانی غدد پستانی سگ انجام شد. سلول­های سرطانی غدد پستانی سگ (cf41.mg) در مجاورت دوزهای 5، 10، 25، 50 و100 میکرومولار از عصاره زیرفون در محیط کشت به مدت 24، 48 و 72 ساعت پاساژ داده شدند. جهت بررسی میزان سلول­های زنده پس از انجام پاساژ از روش MTT  (microculture tetrajolium test) استفاده شد. برای فهم مکانیسم­های درگیر در القای مرگ سلولی در زمان های مذکور،RNA  استخراج و CDNA  سنتزشده و میزان بیان ژن­ کاسپاز­های 3 و 9  با استفاده از پرایمرهای  مختص به آنها به روشreal time PCR   و RT-PCR مورد بررسی قرار گرفتند. فعالیت ضدسرطانی این عصاره پس از 48 ساعت و با دوز 25 میکرومولار بیشترین تاثیر را داشت. نتایج آزمونRT-PCR  حاکی از بیان ژن کاسپاز­های 3 و 9 در نمونه­های تیمارشده در زمان­های 24، 48 و 72 ساعت بود. همچنین میزان بیان ژن کاسپاز 3 در دوزهای 10 و 100 میکرومولار و بیان کاسپاز 9 در دوز10 میکرومولار بیشتر از بقیه بود. نتایج حاصل از این مطالعه تأیید­کننده اثر مهاری عصاره  گیاه زیرفون بر تکثیر رده سلول­های سرطانی غدد پستانی سگ (cf41.mg) می­باشد.

کلیدواژه‌ها

عصاره گیاه زیرفون؛ کاسپاز 3؛ کاسپاز 9؛ سلول‌های سرطانی غدد پستانی سگ

مراجع

• Brizi, M.R., Marrassini, C., Zettler, G., Ferraro, G., Anesini, C. (2012). Comparative antiproliferative action of two extracts from Tilia x viridis on normal and tumoral lymphocytes: relationship with antioxidant activity. Chinese Medicine, 3: 20-29.
• Cassali, G.D., Lavalle, G.E., De Nardi, A.B., Ferreira, E., Bertagnolli, A.C., Estrela-Lima, A., et al. (2011). Consensus for the Diagnosis, Prognosis and Treatment of Canine Mammary Tumors. Brazilian Journal of Veterinary Pathology, 4(2): 153-180.
• Janeklang, S., Nakaew, A., Vaeteewoottacharn, K., Seubwai, W., Boonsiri, P., Kismali, G., et al. (2014). In vitro and in vivo antitumor activity of tiliacorinine in human cholangiocarcinoma. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention, 15(17): 7473-7478.
• Kim, K.H., Moon, E., Kim, S.Y., Choi, S.U. and Lee, K.R. (2012). Lignan constituents of Tilia amurensis and their biological evaluation on antitumor and anti - inflammatory activities. Food and Chemical Toxicology, 50(10): 3680-3686.
• Marrassini, C., Anesini, C. and Ferraro, G. (2011): HPLC fingerprint of a flower extract of Tilia x viridis and correlation with antiproliferative and antioxidant activity. Phytotherapy Research, 25(10): 1466-1471.
• Pan, D., Boon-Unge, K., Govitrapong, P. and Zhou, J. (2011). Emetine regulates the alternative splicing of caspase 9 in tumor cells. Oncology Letters, 2(6):1309-1312.
• Pecorino, L. (2012). Molecular Biology of Cancer. 3rd ed., UK: Oxford University Press, pp: 10-11.
• Ruberte, J., Sautet, J.Y., Gine, J.M., Lopez, C. and Rodriguez, A. (1990). Topography of lymphatic drainage from mammary glands of the bitch. Anatomia, Histologia, Embryologia, 19(4): 358-347.
• Sefidabi, R., Mortazavi, P. and Hoseni, S. (2016). Antiproliferative effect of berberine on canine mammary gland cancer cell culture. Biomedical Report, 6(1): 95-98.
• Slatter, D. (2003). Text Book of Small Animal Surgery.3rd ed., Elsevier Science, pp: 349-350.
• Yayalai, Y., Celik, I. and Bati B. (2014). Hepatoprotective and antioxidant activity of Linden (Tilia platyphyllos L.) infusion against ethanol-induced oxidative stress in rats. The Journal of Membrane Biology, 247(2): 181-188.
• Zargari, A. (1989). Medicinal Plants. 7th ed., Iran: Tehran University Press, pp: 399. [In Persian]