بررسی ‌پاسخ ‌IgE ،IgG تام انسانی و زیر کلاس‌های آن علیه آنتی‌ژن‌های خام مایع کیست هیداتیک گاو، گوسفند، موش و آنتی‌ ژنB با استفاده از روش الایزا

پژوهش های بالینی و آزمایشگاهی دامپزشکی

دوره 6، شماره 3 - شماره پیاپی 19، مهر 1392، صفحه 45-54   

نوع مقاله: مقاله پژوهشی

چکیده

استفاده از آنتی­ژن­های خام مایع کیست هیداتیک با منشأ حیوانی و بررسی پاسخ­های ایمونولوژیکی، در تشخیص صحیح و به موقع بیماری با استفاده از روش­های سرولوژی کاری ارزشمند است. مطالعه حاضر با هدف مقایسه پاسخ سرم­های انسانی به آنتی ژن­های مورد مطالعه گاو، گوسفند، موش و آنتی­ژن B برای دسترسی به آنتی­ژنی که بیشترین پاسخ را ایجاد کند، طراحی و اجرا گردید. ازکشتارگاه صنعتی ایلام تعداد 30 نمونه مایع کیست هیداتیک جداگانه از هر میزبان گاو و گوسفند، جمع­آوری و آنتی­ژن اولیه، استخراج و آماده­سازی گردید. سه گروه موش  Balb/c با آنتی­ژن خام مایع کیست هیداتیک گوسفندی به طور تجربی آلوده شدند. سرم انسان­های بیمار هیداتیدی علیه آنتی­ژن­های مورد مطالعه، آزمایش شدند و پاسخ آنتی­بادی­های E، G تام انسانی و زیر کلاس­های آن علیه آنتی­ژن­های مذکور با استفاده از روش الایزا به صورت مورد-شاهدی بررسی گردیدند. شدت پاسخ به هر آنتی­ژن محاسبه و با دیگر آنتی­ژن­ها مقایسه شد. از آزمون­­های آماری Anova   و Post Hoc برای تحلیل نتایج استفاده شد. IgG4 انسان بیشترین میانگین OD را علیه آنتی­ژن گاو ایجاد نمود. شدت پاسخ برای آنتی­ژن گاو برابر 10.2و سپس آنتی­ژن B برابر9 گزارش شد. پاسخ IgE انسان به غیر ازIgG4 از دیگر زیرکلاس­های IgG بیشتر بود. آنتی­ژن­های مورد مطالعه واکنش متقاطع قابل توجهی ایجاد کردند. آنتی­ژن موش برای طراحی کیت تشخیص بیماری هیداتیدوز انسانی مناسب­تر به نظر می­رسد که حتی می­تواند در طراحی کیت­های تشخیصی جایگزین شود. آنتی بادی­ها IgG تام انسان و زیر­کلاس IgG4  بیشترین شدت پاسخ را علیه آنتی­ژن­های مورد مطالعه در مقایسه با دیگر آنتی­بادی­ها ایجاد کردند.

کلیدواژه‌ها

کیست هیداتیک؛ آنتی‌ژن؛ گاو؛ موش‌؛ گوسفند؛ الایزا

مراجع

1-     ارفع، ف. (1388): کرم شناسی پزشکی، سستودها. چاپ ششم، تهران، انتشارات خسروی، صفحه 124-115.

2-       اسلامی، ع. (1385): کرم شناسی دامپزشکی، سستودها. چاپ سوم، تهران، انتشارات دانشگاه تهران، صفحه 146-144.

3-     موبدی، ا.، دلیمی، ع. (1374): اپیدمیولوژی کیست هیداتیک در ایران و جهان. چاپ اول، تهران، انتشارات مقدم، صفحه 147-132.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

4-      Auer,H., Stockl, C., Suhendra, S.,(2009): Sensitivity and specificity of new commercial tests for the detection of specific Echinococcus antibodies.Wien Klin Wochenschr:37-41

5-      Beaver, P.C., Jung, R.C., Cupp, E.W., (1984):Cyclophyllideantapeworms. In: Clinical parasitology. 9th ed.Philadelphia:Lea and Febiger:527-43

6-      Bowles, J., Blair, D., McManus, D.P.,(1992):Genetic variants within the genus Echinococcus identified by mitochondrial DNA sequencing. Mol Biochem Parasitology.54(2): 165-173

7-      Dempster, R.P., Berridge, M.V., Harrison, G.B., Heath, D.D.,( 1991): Echinococcus granulosus: development of an intermediate host mouse modle for use in vaccination studies. International Journal Parasitology.21(5):549-554

8-      Golass, L., Abebe, T., Hailu, A.,(2011): Evaluation of crud hidatid cyst fluid antigen for the serological diagnosis of hydatidosis in cattle. Journal Helmintology.85(1):100-108

9-      Jahani, Z., Meshgi, B., Ragabi.B, M., Jalousian, F.,(2014):Improved serodiagnosis of hydatid cyst diseas using gold nanoparticle labelee antigen B in naturally infected sheep. Iranian journal parasitology.9(2):218-225

10-  Jiang, L., Zhang, Y. G., Liu, M. X.,(2012): Analysis on the reactivity of five subunits of antigen B family serodiagnosis of echinococcosis.Exp Parasitology.131(1):85-91

11-  Khosravi, A., Ghafourian,S., Shamsi, M., Sadeghifard, N., Maleki, A., Babaahmadi, E.,(2012): Crossreaction beetwin the crud hidatid cyst fluid antigens of human and animals origin in response to human IgG class and subclass.Journal Parasitology Research.b:947-948

 

 

 

 

12-  Khosravi, A., Shamsi, M., Sadeghifard, N., Ghafourian,S.,(2012):Evaluation of mice,sheep and human IgG and IgE antibody responses aginst the mice crud Hydatid cyst fluid(HCF)antigens.Journal of Cell and Biology.6(5):66-72

13-  Liance, M., Janin, V., Bresson-Handi, S., (2000) : Immunodiagnosis of Echinococcus infections: confirmatory testing and species differentiation by a new commercial Western Blot.Journal Clincal Microbiology.38(10):3718-3721

14-  Mamuti, W., Yamasaki, H., Sako, Y., Nakaya, K., Nakao, M., Marshall ,W., (2002) : Usefulness of Hydatid Cyst Fluid of Echinococcus granulosus developed in mice with secondary infection for serodiagnosis of cystic echinococcosis in humans. clinical and diagnostic laboratory immunology. 9(3):573-576

15-   Sari, C., Ertug, S., Karadam, S. Y.,(2009): The comparative evaluation of Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA), Indirect Hemagglutination Test (IHA) and Indirect Fluorescent Antibody Test (IFAT) in the diagnosis of cystic echinococcosis.Turkiye Parasitology Derg.33(1): 73-76

16-  Sbihi, Y., Jansen, D., Osuna, A.,( 1996): Serologic recognition of hydatid cyst antigens using different purification methods.Diagnosis Microbiology Infection Disease.24:205-211.

17-  Sbihi , Y. ,  Janssen , D. , Osuna,   A . ,   (1997): Specific recognition of hydatid cyst antigens by serum IgG, IgE, and IgA using western blot. Journal Clinical Laboratory Anal.11(3):154-157.

18-  Siracusano, A., Buttari, B., Delunardo, F., Profumo, E., Margutti, P., Ortana, E., Rigano, R., Teggi, A.,( 2004): Critical points in the immunodiagnosis of cystic echinococcosis in humans.journal Parasitologia.46:401-403

19-  Tabatabaie, F., Akhlaghi, L., Noori, M., Maleki, F.,(2013):Prepration and purification of antigens of hydatid cyst fluid by serologic diagnosis. Annals of Biological Reaserch.4(6):236-241

20-  Tawfeek, G. M., Elwakil, H. S., El-Hoseiny, L., :(2011) Comparative analysis of the diagnostic performance of crude sheep hydatid cyst fluid, purified antigen B and its subunit (12 Kda), assessed by ELISA, in the diagnosis of human cystic echinococcosis.Parasitology Reserch.108(2):371-376

21-  Wen, H., Craig, P.S.,( 1994): Immunoglobulin G sub class responses in human cystic and alveolar echinococcosis. Am Journal Tropical Medical Hygiene.51:741-748

22-  Zhang, W., You, H., Li, J., Zhang, Z., Troson, G., Ali, H., (2003): Immunoglobulin profiles in murine intermediate host modelof resistance for Echinococcus grnulosus infection. Parasite Immunology.253:161-168.