جداسازی و تعیین هویت مولکولی مایکوباکتریوم ایویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس از نمونه شیر گاوداریهای استان تهران

نشریه علمی میکروبیولوژی دامپزشکی

دوره 17، شماره 2 - شماره پیاپی 43، مهر 1401، صفحه 85-94   

نوع مقاله: مقاله پژوهشی (اصیل)

شناسه دیجیتال (DOI): 10.30495/jvm.2022.1957895.1207

نویسندگان

طیبه حسن سلطان سولقانی¹؛ نادر مصوری^{* 2}؛ راضیه نظری(نویسنده مسئول دوم)³؛ کیوان تدین⁴؛ محمدرضا ذوالفقاری⁵

¹دانشجوی گروه میکروبیولوژی، واحد قم ،دانشگاه آزاد اسلامی ، قم، ایران

²دانشیار، آزمایشگاه رفرانس سل گاوی، موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی (تات)، تهران

³دانشیارگروه میکروبیولوژی- دانشکده علوم- دانشگاه آزاد اسلامی قم

⁴موسسه تحقیقات واکسن وسرم سازی رازی کرج

⁵گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد قم، ایران

چکیده

با توجه به شیوع بالای بیماری یون در گله های گاو در سطح کشور و مخاطرات بهداشتی و آسیب های اقتصادی ناشی از شیوع این بیماری؛ به منظور بررسی فراوانی مایکوباکتریوم پاراتوبرکلوزیس مطالعه‌ ای در گاوداریهای فعال استان تهران انجام شد. 8000 نمونه سرمی گاو گاوداریهای اطراف تهران با استفاده از کیت الایزای موسسه رازی غربالگری شدند. نمونه های شیر از گاوهای رآکتور شناسایی شده، برای آزمایشهای PCR-IS900 مستقیم از نمونه شیر و کشت نمونه‌های مذکور در محیط های کشت خاصMAP (هرولداگ مایکوباکتین دار و بدون مایکوباکتین) برای جستجوی مایکوباکتریوم ایویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس جمع آوری شد. بر روی جدایه های حاصل از کشت، آزمایش های تاییدی PCR-16srRNA و PCR-IS1311 وPCR-IS900 انجام شد. در نتیجه آزمایش الایزا سرمی 8000 راس گاو، 25دام (3/0 درصد) مثبت تشخیص داده شد. از 25 نمونه شیر، 8 مورد (1/0 درصد) درآزمایش مستقیم PCR-IS900 مثبت شدند؛ همچنین تنها نتیجه 3 مورد (04/0 درصد) مورد در جداسازی مایکوباکتریوم ایویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس از طریق کشت و آزمایشات تاییدی PCR ‌، مثبت شد.
با توجه به اینکه در مرحله تحت بالینی بیماری، انتشار باکتری در شیر دام وجود ندارد و شناسایی باکتری از طریق کشت و PCR جواب منفی کاذب می دهد، لذا برای جلوگیری از ضررهای اقتصادی در این مرحله روش الایزا با توجه به حساسیت پایین و ویژگی بالا جهت غربالگری موارد عفونی برای جداسازی دام های آلوده از گله مناسب تر می باشد و از کشت به عنوان روش استاندارد و PCR روشی با حساسیت و ویژگی بالا برای شناسایی دقیق و تایید گاوهای دفع کننده پاراتوبرکلوزیس می توان استفاده کرد.

کلیدواژه‌ها

جداسازی؛ گاوداریهای استان تهران؛ مایکوباکتریوم ایویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس؛ یون

مراجع

WWW.bah.state.mn.us(Minne sota Board of Animal Helth )
1. Al Hajri, S. M., & Alluwaimi, A. M. (2007). The efficiency of ELISA and PCR in detecting subclinical paratuberculosis in the Saudi dairy herds. Pakistan Journal of Biological Sciences: PJBS, 10: 1906-1909.
2. Ansari-Lari M, Haghkhah M, Bahramy A, Novin Baheran AM. (2009). Risk factors for Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis in Fars province (Southern Iran) dairy herds. Tropical animal health and production Apr;41:553-7.
3. Anzabi Y, Tabatabayi AH, Asgharzadeh M.( 2005). A survey on the infection status of Mycobacterium avium paratuberculosis in dairy cattle using PCR of Tabriz. Journal of Iran veterinary science;4:125-31.
4. Badiei A, Mousakhani F, Barin A, Hamidi A, Zafari M. (2012). Comarison of direct microscopic examination, Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA), culture and Nested-PCR for diagnosis of herds bulk tank milk infection with Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis. Veterinary Clinical Pathology The Quarterly Scientific Journal Feb 20:1369-78.
5. Barratt, A.S., Arnoult, M.H., Ahmadi, B.V., Rich, K.M., Gunn, G.J. and Stott, A.W., )2018(. A framework for estimating society's economic welfare following the introduction of an animal disease: the case of Johne's disease. PLoS One, 13: p.e0198436.
6. Barrington GM, Gay JM, Eriks IS, Davis WC, Evermann JF, Emerson C, O'Rourke JL, Hamilton MJ, Bradway DS.) 2003(. Temporal patterns of diagnostic results in serial samples from cattle with advanced paratuberculosis infections. Journal of veterinary diagnostic investigation
Mar;15:195-200.
7. Begg, D.J., O’Brien, R., Mackintosh, C.G. and Griffin, J.F.T., (2005). Experimental infection model for Johne's disease in sheep. Infection and immunity, 73: 5603-5611.
8. Collins MT, Spahr U, Murphy PM. Ecological characteristics of M. )2001(.
paratuberculosis. Bulletin-International Dairy Federation 362:32-40.
9. Garcia, A.B. and Shalloo, L.( 2015). Invited review: The economic impact and control of paratuberculosis in cattle. Journal of dairy science, 98: 5019-5039.
10. Giese SB, Ahrens P. Detection of Mycobacterium avium subsp. )2000(. paratuberculosis in milk from clinically affected cows by PCR and culture. Veterinary microbiology Dec 20:77:291-7.
11. Grant IR, Ball HJ, Rowe MT.( 2002). Incidence of Mycobacterium paratuberculosis in bulk raw and commercially pasteurized cows' milk from approved dairy processing establishments in the United Kingdom. Applied and Environmental microbiology May;68:2428-35.
12. Hatamifar M, Mosavari N, Kazemi J. (2017). Designing of Indirect ELISA system using secreted antigens of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis for Diagnosis of paratuberculosis. Iranian Journal of Medical Microbiology Jun 10;11:26-33.
13. Heidarnejhad O, Safi S, Mosavari N, Keshavarz R. (2017). Sero-prevalence of subclinical paratuberculosis (Johne's disease) in dairy farms of Tehran-Iran using absorbed ELISA assay. Journal of Comparative Pathobiology Sep 23;14:2239-46.
14. Köhler H, Burkert B, Pavlik I, Diller R, Geue L, Conraths FJ, Martin G. )2008(. Evaluation of five ELISA test kits for
the measurement of antibodies against Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis in bovine serum. Berliner und Munchener Tierarztliche Wochenschrift May 1;121:203-10.
15. Nielsen, S.S., Thamsborg, S.M., Houe, H. and Bitsch, V. (2000). Bulk-tank milk ELISA antibodies for estimating the prevalence of paratuberculosis in Danish dairy herds. Preventive Veterinary Medicine. 44: 1-7
16. Pillai SR, Jayarao BM. (2002). Application of IS900 PCR for detection of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis directly from raw milk. Journal of Dairy Science May 1;85:1052-7.
17. Scanu AM, Bull TJ, Cannas S, Sanderson JD, Sechi LA, Dettori G, Zanetti S, Hermon-Taylor J. (2007). Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis infection in cases of irritable bowel syndrome and comparison with Crohn's disease and Johne's disease: common neural and immune pathogenicities. Journal of clinical microbiology Dec;45:3883-90.
18. Stabel, J.R., Wells, S.J. and Wagner, B.A. (2002). Relationships between fecal culture, ELISA, and bulk tank milk test results for Johne’s disease in US dairy herds. American Dairy Science Association. 85: 525-531
19. Taylor TK, Wilks CR, McQueen DS. (1981). Isolation of Mycobacterium paratuberculosis from the milk of a cow with Johne's disease. Veterinary Record;109:532-3.
20. Vans nick E, De Rijk P, Vercammen F, Geysen D, Rigouts L, Portaels F. (2004). Newly developed primers for the detection of Mycobacterium avium subspecies Para tuberculosis. Veterinary microbiology Jun 3; 100:197-204.